新たに分離されたリネゾリド耐性MRSA株の分子遺伝学的解析

Molecular genetic analysis of linezolid - and methicillin - resistant staphylococcus aureus

Creators Mizuno Hidekazu

山口大学医学部附属病院において,世界的に見ても報告が少ないリネゾリド(linezolid；LZD)に耐性を示すMRSAが分離された.患者は急性骨髄性白血病の既往をもち,造血幹細胞移植後にMRSAによる感染症を繰り返していた.LZD耐性MRSAはLZDの投与合計103日後の糞便から検出され,その最小発育阻止濃度は32μg/mlであった.臨床分離株において,LZD耐性菌が誘発されることを証明した報告はこれまでに見あたらない.そこで,LZD投与中に分離されたLZD耐性株と,LZD投与以前および投与中止後に同患者より分離されたMRSA株を分子遺伝学的に比較し検討した.異なる時期に分離されたMRSAの３株について,薬剤感受性の比較(antibiogram),S.aureusに特異的なspa遺伝子の配列の比較(spa typing)およびパルスフィールド電気泳動(PFGE)によりクロナリティーを解析した.その結果,LZD投与中の耐性株とLZD投与以前の株は同一クローンであり,この初期株が合計103日間のLZD長期投与により耐性化したと考えられた.また,LZD投与中止後に検出された株は別クローンであることから,LZD治療中に新たなMRSA株による感染も起こしていたことが判明した.次にLZD耐性株の変異領域を調べるために,23S rRNA domain Vの塩基配列解析を行い,耐性株がG2576T変異を持つことを見いだした.さらに分離したLZD耐性株の増殖速度は感受性株と比較して劣り,薬剤感受性試験の際の推奨された培養時間内では判定に注意を要し,培養期間の延長が必要なことが明らかとなった.これらのことから,LZD耐性株を誘発する危険性があるLZDの長期投与は謹むべきであり,その耐性株の薬剤感受性の判定には,十分な発育を確認した後の注意深い判定が必要と考えられた.

A strain of linezolid-resistant MRSA was isolated from a patient with acute myeloid leukemia after hematopoietic stem cell transplantation in the third relapse. The MIC to linezolid of the MRSA isolate was 32μg/ml. PCR amplification and DNA sequence analysis of domain V region of 23S rRNA demonstrated a G2576T mutation in the linezolid-resistant MRSA isolate. Pulsed-field gel electrophoresis, spa typing and antibiogram analysis showed the genetical similarity of the linezolid-resistant MRSA isolate to the linezolid-susceptible strain isolated from the patient before linezolid therapy. These results indicate that linezolid-resistant MRSA was induced under the selective pressure of prolonged linezolid therapy in the linezolid-susceptible MRSA isolate. Moreover, the growth of the linezolid-resistant MRSA isolate was slower than that of the linezolid-susceptible MRSA isolate, and incubation took at least 48 hours for the susceptibility test of a linezolid- resistant MRSA isolate. These results indicate that long term linezolid therapy should be avoided and the susceptibility test of linezolid should be carefully performed.

[ISSN]0513-1731

[NCID]AN00243156